细胞株要进行严格管理，主要规定有以下几点
点击次数：1768 更新时间：2019-10-28
细胞株要进行严格管理，主要规定有以下几点
简单来说就是细胞株的管理规定主要有以下几种。
1. 如有新进细胞株，请告知单姝娴，由单姝娴分配给专门负责人进行细胞的冻存保种；
2. 实验室任何人员需要复苏细胞，需要提前一个工作日通知该细胞株的负责人，经允许后方可使用；
3. 负责人需监督使用人员做好存取细胞记录，使用人员的细胞复苏情况必须反馈给负责人，并做好记录；
4. 定期整理细胞株：，负责人需对对半年以上未复苏的细胞株进行维护，重新复苏并做好细胞状态的记录；
5. 为防止细胞变异，负责人仅对复苏细胞的Y1-Y3代进行冻存，密度不小于1/4皿；对肿瘤细胞的形态，生长周期进行密切观察，如发生明显变化，则不做冻存处理；
6. 若复苏细胞人员复苏同一细胞株两次均未成活，需通知负责人进行检查和复苏，如贮存细胞确实出现问题，则及时清理
7. 冻存条件：建议采用40-50%FBS+8%-10%DMSO+该细胞株无血清培养基 冻存方法： a) 梯度冻存：4℃——1h；-20℃——30min；-80℃——过夜 b) 使用冻存盒：直接放入-80℃冰箱中过夜（有些细胞不适应此种方法） 复苏方法： 1) 打开水浴，将培养基放入水浴中，待其稳定至37℃； 2) 细胞从液氮内取出后，应快速将细胞放于37℃ 水浴中，轻轻振摇，使其溶化，(尽量 避免溶化前冻存管脱离水浴)； 3) 将溶化后将细胞冻存悬液离心，转速1000rpm，3min, 后弃去上清，使细胞重悬在新 鲜培养液中，进行培养； 4) 细胞在培养箱中贴壁24h后，更换新鲜培养基，待其长满，进行传代
8. 液氮罐的使用
1) 开启液氮罐时，请带好防护工具，防止冻伤；
2) 使用细胞的人员应做好复苏记录，格式如下：
3) 负责人应做好细胞整理保藏记录，
4) 请使用细胞的同学珍惜冻存细胞同学的劳动，禁止短期内取用同一细胞株的多
5) 管冻存细胞，复苏后自行冻存细胞以供自己的实验使用，存于-80℃冰箱，必须写明细 胞种类、冻存时间、冻存人等细节。
首先得通过稳定细胞系的建立，得到细胞株，其次按照细胞株的管理规定保存，具体如下：细胞株的名称，种类，来源，负责人，保存的位置。
