Hela/DDP细胞株构建实验外包的好处有哪些呢?
点击次数:1877 更新时间:2018-10-25
Hela/DDP细胞株构建实验外包的好处有哪些呢?
稳转细胞系(稳定表达Hela/DDP细胞株)指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转Hela/DDP细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上,使细胞长期稳定表达该基因。
实验外包大的意义就是能够在顾客把的实验所需要的相关要求和资料转交给可以承担这项的机构或者团体,后在双方合作下得到双方都满意的结果,终实现双赢。稳定Hela/DDP细胞株构建的实验就很好的反映出了这一个特点。
这项实验外包的具体流程简单来说就是根据细胞特点、实验特点或实验需求,设计实验方案并与客户讨论确定实验方案,进行预实验,通过转染含有GFP报告基因的质粒确定佳转染试剂,并优化转染条件,杀伤曲线绘制,转染质粒,铺板,用不同抗生素浓度筛选细胞单克隆,qPCR和WB检测稳定克隆的外源基因表达水平。好处就是经过系统的优化,通过采用已完善的病毒介导方法建立稳定细胞系。通过病毒介导,将外源基因或RNAi序列导入到靶细胞内,与宿主细胞基因组整合,再通过抗性素筛选,得到稳定表达或干扰的Hela/DDP细胞株。
实验外包中使用到的病毒介导的方法建立稳定细胞系具有稳定性强,效率高,表达时间长,成本低的特性,可大大节省实验时间,为后续实验奠定基础,更能使顾客和实验方实现双赢。
实验内容与方法:
1.体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法诱导细胞的耐药性
2.MTT法测定药物对亲本细胞和耐药细胞的IC50,计算耐药指数
稳转细胞系(稳定表达Hela/DDP细胞株)指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转Hela/DDP细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上,使细胞长期稳定表达该基因。
实验外包大的意义就是能够在顾客把的实验所需要的相关要求和资料转交给可以承担这项的机构或者团体,后在双方合作下得到双方都满意的结果,终实现双赢。稳定Hela/DDP细胞株构建的实验就很好的反映出了这一个特点。
这项实验外包的具体流程简单来说就是根据细胞特点、实验特点或实验需求,设计实验方案并与客户讨论确定实验方案,进行预实验,通过转染含有GFP报告基因的质粒确定佳转染试剂,并优化转染条件,杀伤曲线绘制,转染质粒,铺板,用不同抗生素浓度筛选细胞单克隆,qPCR和WB检测稳定克隆的外源基因表达水平。好处就是经过系统的优化,通过采用已完善的病毒介导方法建立稳定细胞系。通过病毒介导,将外源基因或RNAi序列导入到靶细胞内,与宿主细胞基因组整合,再通过抗性素筛选,得到稳定表达或干扰的Hela/DDP细胞株。
实验外包中使用到的病毒介导的方法建立稳定细胞系具有稳定性强,效率高,表达时间长,成本低的特性,可大大节省实验时间,为后续实验奠定基础,更能使顾客和实验方实现双赢。
实验内容与方法:
1.体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法诱导细胞的耐药性
2.MTT法测定药物对亲本细胞和耐药细胞的IC50,计算耐药指数