如果L1210/DDP细胞株细胞发生微生物污染时，应如何处理？

　　L1210/DDP细胞株在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是L1210/DDP细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。
　　如果L1210/DDP细胞株细胞发生微生物污染时，应如何处理？
　　原则上：直接灭菌后丢弃之。
　　当L1210/DDP细胞株重要的培养污染时，研究者可能试图消除或控制污染。首先，确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母，把污染细胞与其它细胞系隔离开，用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台，检查HEPA过滤器。
　　L1210/DDP细胞株高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性，因而，做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。
　　1.L1210/DDP细胞株在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。
　　2.L1210/DDP细胞株分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗生素加入到每一个孔中。例如，两性霉素B推荐下列浓度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。
　　3.每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。
　　4.确定抗生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2——3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2——3代。
　　5.L1210/DDP细胞株在无抗生素的培养基中培养细胞一代。
　　6.重复步骤4。
　　7.L1210/DDP细胞株在无抗生素的培养基中培养4——6代，确定污染是否以已被消除。