A549/DDP 人肺癌顺铂耐药株

细胞株名称：A549/DDP 人肺癌顺铂耐药株

种属：人组织来源：肺癌

生长特性：贴壁生长形态特征：上皮细胞

微生物及支原体检测：阴性

安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。

培养条件：    *培养基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+2000ng/ml DDP
    血清我们推荐用:
    GIBCOFBS-10099-141 或 HYCLONEFBS-SH30084.03。
    培养条件：37.0C   carbon dioxide(CO2),5%A549/DDP 人肺癌顺铂耐药株

传代方法：    收到细胞后，在倒置镜下(是在 4X 物镜)观察整个细胞生长情况。
    （一）如果细胞未长满，用 75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml 新鲜培养液后继续培养。
    (二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：
    1. 弃去培养液，用 PBS（不含钙,镁离子）洗 1-2 次。
    2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱 1-3 分钟预热，之后翻转培养瓶 10-30 秒，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。
    3. 按 6-8ml/瓶补加*培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的*次传代一般是一传二。
    注：1、观察细胞在低倍镜（4 或 5X 物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在 10X 或 20X 物镜下。
    2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。A549/DDP 人肺癌顺铂耐药株
    3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。
    4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们。..

冻存方法：    冻存液：90%胎牛血清，10%DMSO
    储存：液氮储存